一、服务内容
本服务项目主要是根据客户的要求免疫Balb/c小鼠,提取B细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,制备特异性的鼠单克隆抗体。
1、客户可提供抗原制备鼠源单克隆抗体,抗原可包含:天然蛋白、重组蛋白、细胞或细胞提取液、病毒或病原体、菌种或菌体蛋白、小分子多肽、化合物;其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶联载体蛋白。
2、客户可提供蛋白名称、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息,我公司根据客户的实验需求设计抗原、合成多肽抗原或表达蛋白抗原,免疫动物制备单克隆抗体。
3、可提供抗体标记、抗体对筛选、试剂盒开发、免疫学检测等增值服务。
二、 服务流程
1、客户提交单克隆抗体制备请求并明确对抗体的要求,与公司商定具体的制备项目、数量和费用,双方签订《委托单克隆抗体制备合同》。
2、客户提供抗原或抗原信息,我公司按照合同要求安排单克隆抗体制备服务,并在规定时间内完成制备委托。
3、抗体制备完成后,我公司按照客户要求纯化分装,免费低温邮寄给客户,同时提供抗体制备报告。
三、 样品要求
1、客户提供制备抗体所需蛋白或多肽片段,抗原纯度>85%,数量>10mg,浓度>1mg/ml。
2、客户提供的抗原信息应包含蛋白抗原的英文全称、种属信息、GeneID或序列信息;化合物抗原应提供化学结构式、活性基团、溶解性等信息。
3、请提前说明样品来源和生物危害等情况,或其他任何特殊情况。
四、 单克隆抗体服务说明
1、由于免疫抗原的多样性,对于合成困难的多肽和表达困难的蛋白,或免疫原性较差的抗原,双方可商议确制备周期和制备费用。如果是抗原(主要是多肽抗原或小分子抗原)的免疫原性差,无法使动物产生免疫应答反应,则合同终止。
2、 细胞株保存: 细胞株冻存后,科瑞奥博可免费帮客户保存杂交瘤细胞3个月,如果3个月后,客户有继续保存细胞株的需求,每个细胞株每月收费100元,或800元/包年。
3、 保密承诺:客户对其委托制备的单克隆抗体拥有完全的知识产权、商业价值和使用权,我公司有为客户保密的义务和职责,承诺严格保护客户提供产品信息资料不外泄。
五、单克隆抗体收费标准
步 骤 | 内 容 | 标 准 | 时 间 | 收 费 (元) |
阶段Ⅰ | 制备抗原 | a. 客户提供蛋白抗原,或多肽偶联蛋白; | 0 | 0 |
b. 客户提供多肽,科瑞奥博偶联载体蛋白; | 1周 | 1000 | ||
c. 原核系统表达蛋白; | 4周 | 10000 | ||
d. 设计、合成多肽、偶联载体蛋白(15aa左右); | 2周 | 1500 | ||
e. 磷酸化、甲基化修饰多肽、偶联载体蛋白(包 括:设计修饰多肽两条,分别合成及偶联,未 修饰多肽一条); | 2周 | 4000 | ||
f. 特殊修饰多肽 | 待定 | 询价 | ||
阶段Ⅱ | 动物免疫和ELISA检测 | 蛋白抗原免疫5只Balb/c小鼠,最终达到融合效价>1:16000 | 6-8周 | 4500 |
修饰多肽抗原设计两条,则分别免疫两组Balb/c小鼠,即5只×2=10只,最终取一只达到融合效价>1:16000以上 | 6-8周 | 5500 | ||
阶段Ⅲ | 融合和筛选 | 选出最佳免疫应答的一只Balb/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,经过多次筛选得到需要的杂交瘤细胞株, 在经过多次测定细胞株稳定 性试验,优化出稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株; | 4-8周 | 10000 |
阶段Ⅳ | 亚克隆及扩 增 | 将已选出的阳性的杂交瘤细胞株通过有限稀释法进行亚克隆,最后确定一株阳性克隆做亚型鉴定。 | 4-6周 | 7000 |
阶段Ⅴ | 生产腹水 | 选择2个阳性克隆株或指定细胞株大量生产腹水,10-20ml/株 | 3周 | 3000 |
阶段Ⅵ | 抗体纯化 | a.Protein G纯化10mL腹水 | 1周 | 1000 |
b.免疫亲和层析纯化10mL腹水 | 1周 | 3000 | ||
阶段Ⅶ | 完成交付产品 | a.2-5个亚克隆细胞株 b.5-10mL腹水×2株 (冻干粉) c.IgG: 1-5mg (免疫纯化) (冻干粉) d.10mg (Protein G纯化) (冻干粉) e.制备报告 | ||
可提供增值服务 | 科瑞奥博可根据客户需求提供下列标记、检测服务(询价): 1.抗体标记:酶标记、生物素标记、荧光素标记、胶体金标记 2.制备抗体亲和层析柱(客户用于提纯蛋白) 3.抗体对筛选,试剂盒开发 4.免疫学检测:WB检测,IHC/IF检测,FCM检测 | 询价 |