普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF(100mM,1.5ml)
产品简介:RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。
使用说明 :
如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 5-10×105细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量) 。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品中心
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货号: R0020 基本售价: 160.0 元 规格: -