| 货号 | 30250 | ||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 利用重力流层析纯化His-tagged蛋白 | ||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Performance Ni-NTA Agarose中的Ni-NTA与Sepharose CL-6B support偶联，具有强结合能力，非特异性结合少（参见"One-step purification under native conditions"）。这种材料对于多数的生产规模和柱纯化具有极佳的可操作性。Ni-NTA Agarose可单独订购，也包含在QIAexpressKits中。QIAexpressKits是适用于大肠杆菌His-tagged蛋白高效表达和纯化的完整试剂盒。Principle QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基于获得专利的Ni-NTA（氨基三乙酸镍）树脂，对含有6个或以上组氨酸残基（连续或交替）亲合标签的蛋白选择能力强。该技术可在天然或变性条件下，从所有表达体系中一步纯化几乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四个镍离子螯合位点，与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子脱落，因此具有更强的结合能力，蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。QIAexpress技术可用于从杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌等各种表达体系中纯化His-tagged蛋白。 Procedure His-tagged蛋白的纯化包括四个步骤：裂解、结合、洗涤和洗脱（参见Protein purification with the Ni-NTA protein purification system）。使用QIAexpress技术纯化重组蛋白无需依赖于蛋白的三维结构或6xHis标签。因此可实现在天然或变性条件下，从稀释溶液或细胞裂解液中一步纯化蛋白。可使用强变性剂和洗涤剂高效溶解和纯化受体、膜蛋白和形成包涵体的蛋白。洗涤缓冲液中可包含有能高效去除非特异性结合产物的试剂（见表）。在温和条件下加入100–250 mM咪唑作为竞争性洗脱试剂或降低pH值，可洗脱得到纯化蛋白。
Applications Ni-NTA基质可靠的一步纯化得到His-tagged蛋白，适用于多种应用，包括：
|
| 说明书 |
| ||
| 供应商 | Qiagen |