货号 | 36113 | ||||||||||||||||||||||||
简介 | 高通量、小规模纯化His-tagged蛋白,利用His标签进行多种磁捕获研究 | ||||||||||||||||||||||||
描述 | Principle QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System包括Ni-NTA Magnetic Agarose Beads(参见Micrograph of Ni-NTA Magnetic Agarose Beads),是基于获得专利的Ni-NTA(氨基三乙酸镍)树脂对含有6个或以上组氨酸残基(连续或交替)的亲合标签的蛋白的强选择能力。该技术可在天然或变性条件下,一步纯化几乎所有His-tagged蛋白(参见Protein purification with the Ni-NTA protein purification system)。NTA含有四个镍离子螯合位点,与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子浸出,因此具有更强的结合能力,制备的蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。QIAexpress技术适用于从杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中纯化His-tagged蛋白。 Procedure 纯化His-tagged蛋白包括4个步骤:细胞裂解,蛋白结合,洗涤和洗脱。利用QIAexpress体系纯化重组蛋白并不依赖于蛋白或His标签的三维空间结构。这一特性使Ni-NTA可在天然或变性条件下,从稀释溶液或裂解液中一步纯化蛋白。另外,可使用强变性剂和洗涤液对受体、膜蛋白和包涵体蛋白进行高效的溶解和纯化。可在洗涤液成分中加入高效去除非特异性结合的各种试剂(参见下表)。最后通过在温和条件下加入100–250 mM咪唑或降低pH值,洗脱得到纯化蛋白。
Applications QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System,包括Ni-NTA Magnetic Agarose Beads,可以可靠的一步纯化蛋白,产物适用于以下应用:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |