货号 | 34850 |
简介 | 高灵敏度、高特异性检测Strep-tagged蛋白 |
描述 | Performance Strep-tag Antibody可对蛋白进行高灵敏度检测(参见"Highly sensitive detection of proteins carrying a Strep-tag"和"Ultrapure protein in two steps")。Principle 基于经验证的6xHis标签和短的Strep-tag II的Two-Step Affinity Purification System采用快速、标准化流程,可简单、高效地纯化得到超纯蛋白。带有双标签的重组蛋白依次经Ni-NTA和Strep-Tactin基质进行纯化。简单的两步亲和纯化可得到具有完全活性、全长的超纯蛋白,适用于各种下游应用。 Procedure 使用pQE-TriSystem His·Strep质粒可在E. coli、昆虫或动物细胞中高效表达带有两个小亲和标签(6xHis标签和Strep-tag II)的重组蛋白。细胞裂解并使细胞裂解液澄清后,先使用经验证的Ni-NTA树脂纯化蛋白。使用咪唑从Ni-NTA基质洗脱得到His标签重组蛋白(同样携带Strep-tag II抗原)直接上样到Strep-Tactin基质,不需要换缓冲液。使用生物素或脱硫生物素从Strep-Tactin洗脱蛋白。两步亲和纯化可得到超纯蛋白(纯度超过98%)(参见"Two-step affinity purification procedure")。纯化的顺序可以颠倒(如先用Strep-Tactin纯化,再进行Ni-NTA纯化)。使用Strep-tag或Anti·His抗体可对蛋白进行高特异性和灵敏度的检测。 Applications 使用Strep-tag Antibody进行检测的两步亲和纯化系统非常适合于对纯度要求很高或难纯化的蛋白。标准化的纯化操作流程不需对蛋白特异性纯化实验方案进行研究和优化,提高了生产量。两步亲和纯化系统的超高纯度和便利性使此方法适用于:
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说明书 | ||
供应商 | Qiagen |