| 货号 | 32942 |
| 简介 | 在E. coli、哺乳动物细胞和昆虫细胞中平行表达His-Strep-tagged蛋白 |
| 描述 | Performance His-Strep pQE-TriSystem Vector Set表达的双标签蛋白可通过两步亲和纯化进行分离，获得超纯（纯度>98%）蛋白（参见Ultrapure protein in two steps）。Principle His-Strep pQE-TriSystem Vector Set可表达同时带有一个6xHis和一个Strep-tag II标签的蛋白。双标签蛋白经两步亲和纯化系统纯化，通过标准化流程简单、高效纯化超纯蛋白。此系统无需研发和优化蛋白特异性操作流程，可提高通量。带有两种标签的重组蛋白可在Ni-NTA和Strep-Tactin基质上进行连续纯化（参见"Two-step affinity procedure"）。两个简单的亲和纯化步骤可获得完全有活性、全长、超纯的蛋白，适用于多种下游应用。Procedure 使用pQE-TriSystem His-Strep载体在E. coli、昆虫细胞或哺乳动物细胞中可有效表达带有两个小亲和标签（6xHis和Strep-tag II标签）的重组蛋白。细胞裂解并澄清裂解液后，首先通过固定化金属亲和层析（IMAC）操作流程纯化蛋白，此流程基于经验证的6xHis-tag-Ni-NTA相互作用。使用咪唑从Ni-NTA基质洗脱后，重组蛋白（也带有Strep-tag II标签）直接加入到Strep-Tactin基质中（参见"Two-step affinity purification procedure"）。无需改变缓冲液。使用生物素或脱硫生物素可从Strep-Tactin基质中洗脱蛋白。使用Strep-tag或Anti·His的小鼠单抗可高特异性和灵敏度地检测蛋白（参见"Highly sensitive detection of proteins carrying a Strep-tag"）。 Applications Two-Step Affinity Purification System非常适合需要高纯度但单独的His标签纯化难以达到的应用，如真核细胞的蛋白表达。Two-Step Affinity Purification System具有的超高纯度和便利性使其适用于：
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| 供应商 | Qiagen |