货号 | 30622 | ||||||||||||||||||||||||
简介 | 通过重力流纯化His-tagged蛋白 | ||||||||||||||||||||||||
描述 | Principle QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System,包括Ni-NTA Spin Columns,原理是基于著名专利技术Ni-NTA(镍-次氮基三乙酸)树脂,用于纯化带有6个或者以上组氨酸残基His标签的蛋白质。该技术能够在天然或者变性的条件下,从任何表达体系中,一步法纯化大多数His-tagged蛋白。NTA有4个镍离子的螯合位,相比金属-螯合纯化系统只有3个与金属离子相互作用的位点,能够更紧密地与镍结合。额外的螯合位点防止镍离子脱落,从而拥有更强的结合能力,并且相比于其他金属-螯合纯化系统,该系统能制备更高纯度的蛋白。QIAexpress体系可以从任何的表达体系中,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌,纯化His-tagged蛋白。(参见"Ni NTA Superflow 96 Columns automated procedure")。 Procedure His-tagged蛋白的纯化过程包括4个步骤:细胞裂解、蛋白结合、洗涤和洗脱(参见"Protein purification with the Ni-NTA Protein Purification System")。利用QIAexpress系统纯化重组蛋白并不取决于蛋白质或者6xHis标签的三维空间结构。这一特性能够在天然或变性条件下,一步从稀释溶液或者粗裂解物中纯化蛋白。强变性剂和清洁剂可以有效的溶解和纯化受体、膜蛋白和形成包涵体蛋白。这些试剂能够高效地去除非特异性结合的污染物,可以包含在洗涤缓冲液中(参见下表)。在温和的条件下,加入100–250 mM咪唑作为竞争物或者降低pH值洗脱纯化的蛋白。
Applications QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System提供可靠的一步法纯化蛋白质,纯化的蛋白质适用于各种应用,包括:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |