货号 | 33203 |
简介 | 表达含有Factor Xa Protease识别位点的His-tagged蛋白 |
描述 | Performance pQE-30 Xa载体用于表达His-tagged硫氧还原蛋白,该标签随后被Factor X Protease完全去除(参见"Digestion of His-tagged thioredoxin with Factor Xa protease")。Principle 尽管蛋白纯化后几乎无需从重组蛋白上去除His亲和标签,但对于某些应用如:X-ray结晶学或NMR结构分析,还是有必要去除标签。 pQE-30 Xa表达载体编码Factor Xa Protease的识别位点,在N端His标签序列和多克隆位点之间。Factor Xa Protease识别Ile-Glu-Gly-Arg氨基酸序列,并切割C端结合精氨酸残基的多肽。如果目的基因在5端通过载体的StuI限制位点进行平端克隆,则Factor Xa Protease切割纯化的重组蛋白N端将无任何来自载体的氨基酸(参见"pQE-30 Xa")。 Procedure 纯化的蛋白用Factor Xa Protease孵育,蛋白酶消化后,目的蛋白利用两步法进行纯化。Factor Xa Protease与Xa Removal Resin结合后通过离心去除,接着切除下来的6xHis-tag 多肽和未消化的His-tagged蛋白被Ni-NTA亲和色谱吸附。 Applications Factor Xa System处理蛋白,需使用pQE-30 Xa载体,Factor Xa System非常适用于需要去除蛋白His标签的应用,包括:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |