货号 | 30600 |
简介 | 纯化和检测大肠杆菌裂解液中的His-tagged蛋白 |
描述 | Performance Ni-NTA Fast Start Kit含有从E.coli裂解上清液中快速、高效纯化His-tagged蛋白所需的所有试剂。该试剂盒中的缓冲液可在天然或变性条件下纯化蛋白(参见High purity proteins under native or denaturing conditions)。Ni-NTA Fast Start Kit的实验流程简单、直观,所含试剂为即用型试剂,因此该试剂盒是刚步入蛋白表达研究领域的科研人员的理想选择。Principle Ni-NTA Fast Start Kit基于获得专利的Ni-NTA(氨基三乙酸镍)树脂,对含有6个或以上组氨酸残基(连续或交替)亲合标签的蛋白选择能力强。该技术可在天然或变性条件下,一步纯化几乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四个镍离子螯合位点,与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子浸出,因此具有更强的结合能力,制备的蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。His标签形成的表位可被该试剂盒中的Penta•His Antibody所识别。 Procedure 使用试剂盒中提供的裂解缓冲液裂解细胞,离心后得到裂解上清液。将裂解液上样至Fast Start Column,His-tagged蛋白高亲合性结合到柱上,非标记蛋白随流出液流出。洗涤后,使用含有咪唑的缓冲液(天然条件)或低pH值得缓冲液(变性条件)洗脱得到纯化的蛋白(参见Highly pure 6xHis-tagged protein)。纯化得到的蛋白可与Penta•His Antibody一同用于SDS-PAGE、Western印迹和免疫检测。Applications Ni-NTA Fast Start Kit可靠的一步纯化得到His-tagged蛋白,适合各种应用,包括:
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说明书 | |||
供应商 | Qiagen |