Ni-NTA Superflow Cartridges (1x5 ml)【科瑞奥博】

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Ni-NTA Superflow Cartridges (1x5 ml)

货号： 30760 基本售价： 2010.0 元规格： 1Reactions

产品信息

概述

货号

30760

简介

利用液相色谱系统纯化His-tagged蛋白

描述

Performance

Ni-NTA相较于其他树脂而言，在提供高产量高纯度的蛋白质方面，有优异的表现（参见Ni-NTA outperforms other resins to deliver high yields of high-purity proteins）。Ni-NTA Superflow镍离子脱落率最低（参见An independent study shows that Ni-NTA loses less nickel than any other tested resin）。而镍离子脱落会使其余带电的配体作为离子交换并结合非标记的蛋白，将污染洗脱组分。Ni-NTA耐受性强，甚至可在10 mM DTT存在的情况下纯化得到高纯度活性蛋白（参见The extra coordination site in Ni-NTA binds nickel ion more tightly than IDA）。

如下表所示，Ni-NTA产品在各个纯度规模都能获得高纯度蛋白Ni-NTA Superflow Cartridges式QIAGEN提供的His-tagged蛋白纯化解决方案中的一部分（参见Scalable purification of nanogram to gram amounts of His-tagged proteins）。

微型至大规模纯化IL -1β的生物制药项目
模型	模型体积	培养液体积	产量	恢复率（%）	纯度*
Ni-NTA Magnetic Agarose Beads （微型规模）	100 μl	1 ml	33 μg	~90%	~97%
Ni-NTA Superflow （小规模）	500 μl	320 ml	6 mg	~80%	~96%
Ni-NTA Superflow （中等规模）	10 ml	1.7 l	109 mg	~80%	~98%
Ni-NTA Superflow （大规模）	100 ml	18 l	2 g	>88%	~97%

Principle

Ni-NTA基质应用亲和层析法纯化His-tagged蛋白（参见Efficient one-step purification of His-tagged proteins）。Ni-NTA稳定性高，可以兼容缓冲剂组分，包括强变性剂、清洁剂甚至还原剂（见下表Reagents compatible with the His/Ni-NTA interaction）。这种灵活性使得研究人员可设计出最佳的纯化方案，同时受益于Ni-NTA卓越的分离特性，通常无需第二次纯化。

能与His/Ni-NTA兼容的试剂
变性剂	清洁剂	还原剂	其他	盐	长期储存
6 M Gu·HCl	2% Triton X-100	20 mM β-ME	50%甘油	4 M MgCl₂	至多30%乙醇
8 M尿素	2% Tween 20	10 mM DTT	20%乙醇	5 mM CaCl₂	或者100 mM NaOH
	1% CHAPS	20 mM TCEP 20 mM	20 mM TCEP	20 mM咪唑	2 M NaCl

Procedure

应用灵敏的Superflow基质，流速可高达10 ml/min（1 ml预装柱）和40 ml/min（5 ml预装柱），有助于加快纯化过程，同时提高通量。预装柱可快速、简单的连接到液相层析系统或手动纯化的注射器上。纯化过程具有高度可重复性，确保之后可制备同样高品质的蛋白质（参见Highly reproducible and reliable purification）。

Applications

Ni-NTA基质可用于大规模His-tagged蛋白，以进行结构研究（如，蛋白结晶或NMR）、或者制备大量（克级）的生物医药产品。

性能
供应商	Qiagen