货号 | 296015 |
简介 | 用于区分活和死亡微生物 |
描述 | Performance 基于PMA的活菌PCR能够明确区分活和死亡细胞的DNA。PMA选择性进入死亡细胞,由光化激活进而嵌入DNA并与之共价结合,从而在后续PCR中强烈抑制后者的扩增反应。因此由死亡细胞DNA生成信号的CT值会发生显著升高,从而实现了对活与死亡细胞之间的明确区分(参见PMA inhibits amplification of dead cell DNA)。Principle 单叠氮丙啶(PMA)是一种光激活的化合物,其在分子生物学应用中被广泛应用于针对微生物生命活/死亡细胞之间的区分工作。当使用特定波长激光激活PMA时,PMA会嵌入DNA并与之共价结合。在后续的PCR反应中上述结合的DNA不被扩增,导致扩增信号降低。 PMA无法穿透完整的生物膜结构。来自活微生物的DNA由于有完整膜结构的包裹而不会受到PMA修饰,因此可以被PCR反应扩增检测出来。微生物死亡细胞的膜结构失去了其原有的保护功能,PMA能够进入细胞并修饰其中的DNA。死亡微生物细胞中经修饰的DNA在PCR反应受到抑制,从而导致扩增信号降低。 Procedure 制备细菌样本并使用PMA进行处理。在BLU-V仪器中使用特定波长激光照射激活PMA化合物之后,其不可逆地结合死亡细胞的DNA,后者在PCR反应中将无法实现扩增。因此,能够检出活细胞的DNA。Applications 区分活/死亡细胞在一些实际应用中扮演着至关重要的角色,例如,衡量净化操作成功与否的卫生检测、以及区分活/死亡的军团杆菌,从而监测病原杀灭效率的的监管合规性水质检测。 |
说明书 | ||
供应商 | Qiagen |