货号 | 69514 |
简介 | 从富集微生物的培养基、食物原材料或成品中提取高品质DNA |
描述 | Performance DNeasymericon Food Kit生产过程中,食物容易受到热、高压和pH值变化的影响,这些会导致DNA降解和片段化。DNeasymericon Food Kit中的优化试剂专为回收短的DNA片段(100 bp)而设计,确保高度片段化的DNA可被有效分离,并在PCR反应中进行扩增。凭借这些优势,DNeasy mericon Food Kit是第一个可广泛应用于从强抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中纯化核酸的试剂盒,结果可靠,而且可得到最佳纯化效果(参见"High yields of DNA with minimal inhibitor carryover")。 mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits热裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit,机械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,两种试剂盒从革兰氏阴性细菌中提取DNA的效率相同。但是,如果从革兰氏阳性细菌中提取DNA,机械裂解更加有效(参见"Efficient bacterial DNA extraction")。 Principle DNeasymericon Food Kit该试剂盒采用改良的CTAB纯化细胞内核酸。CTAB是非离子去污剂,广泛用于从多种类型的组织样本中高效提纯细胞内核酸。与盐浓度相关,CTAB可能与细胞内核酸结合(低盐浓度);也可与细胞内的抑制剂结合,如多糖、蛋白质和植物代谢产物(高盐浓度,如在Food Lysis Buffer中)。 这种提纯方法的步骤少于传统CTAB 操作方法,应用DNeasy mericon Food Kit可在2.5个小时内可处理多达30个样本(参见"Efficient and rapid DNA extraction")。 经优化的方案,采用CTAB和蛋白酶K初步消化紧密组织,然后同时沉淀蛋白质和其他细胞内和来自于食品本身的抑制剂。 离心后抑制剂沉淀下来,而提纯的DNA保留在溶液中。然后进行氯仿抽提,所有剩余的、未沉淀CTAB结合蛋白、CTAB结合杂质或 CTAB 结合多糖都将与其他脂溶性抑制剂一起被抽提入氯仿层。水层中含有DNA和极少的抑制剂,将进一步处理。在水相中加入结合缓冲液(调节结合条件),将其上样到QIAquick Spin Column。纯化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit到目前为止,检测食品病原体的主要方法是通过培养基和/或ELISA分析法。分子检测方法,尤其是real-time PCR,经常作为这些常用方法的补充。 热裂解使用mericon DNA Bacteria Kit,适用于多数易于裂解的革兰氏阴性细菌(如沙门氏菌Salmonella spp.、弯曲杆菌Campylobacter spp. 和阪崎氏肠杆菌Cronobacter spp.)。机械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,适用于革兰氏阳性细菌,如单增李斯特菌Listeria spp.。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的专用化学试剂可最大程度上提高裂解效率,稳定提纯的DNA,并去除可能干扰下游应用的抑制剂。 Procedure DNeasymericon Food Kit使用简单的操作方法,从匀质的食物样本中提纯DNA,获得的纯DNA适用于各种下游应用,如real-time PCR成份分析或GMO检测。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit使用机械裂解(钢珠)和热裂解(煮)的操作方法,从病原体富集的培养基中提纯细菌DNA。两种操作方法都需转移细菌 DNA悬浮液,以适用于real-time PCR病原体检测。 Applications 应用DNeasymericon Food Kit从食物原材料或成品中纯化的DNA适用于各种下游应用,如成份鉴定。 mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于从经过增菌富集培养基中纯化细菌DNA。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |