货号 | 285115 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
简介 | 适用于T. equigenitalis、K. pneumoniae和P. aeruginosaDNA的多重鉴定 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | Performance cador TKP PCR Reagent包含实现T. equigenitalis、K. pneumoniae和P. aeruginosa基因组中高度保守的区域的特异且高效的扩增所需的试剂和酶。此外,cadorTKP PCR Reagent还包括一个异源扩增体系,以鉴别PCR抑制。通过内参(IC)的扩增,检测黄色通道内的荧光信号,测定PCR抑制。内参(IC)的扩增不会影响T. equigenitalis、K. pneumoniae和P. aeruginosa检测试剂的PCR扩增。同时还提供外部阳性对照(TKP Control DNA,包含靶向的T. equigenitalis、K. pneumoniae和P. aeruginosaDNA)。 对每种细菌的DNA进行序列分析,评估分析灵敏度。各real-time PCR实验重复三次。将可观察到扩增现象的最低稀释度的三次平均值定义为检测限(参见下表)。 表1.扩增子的检测阈限
动物样本材料中还可能存在其他多种病原体。采用cador TKP PCR Reagent分析其他细菌种属,检测潜在的交叉反应性(参见下表)。检测目标病原体和潜在的干扰细菌的混合物,以检测干扰性。未观察到交叉反应性或干扰性。 表2.对潜在交叉反应的分析
Principle 在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析系统上,采用cadorTKP PCR Reagent通过real-time PCR可实现T. equigenitalis、K. pneumoniae和P. aeruginosa DNA的鉴定。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上,利用一支试管可鉴别出所有3种动物病原体。同一管内还包括内参,以监测PCR扩增是否成功。Procedure 利用PCR进行动物病原体鉴定是基于病原体基因组中特定区域的扩增。在real-time PCR中,通过与特异性结合扩增产物的寡核苷酸探针相连的荧光染料检测扩增产物。在PCR过程中(实时)监测荧光强度,无需在PCR结束后重新打开反应管即可实现累积产物的鉴定,避免了交叉污染。在Rotor-Gene Q real-time PCR系统上测量绿色、橙色和深红色荧光,检测3种病原体的扩增片段(参见下表)。表3.不同细菌的荧光检测信道
Applications 利用多重real-time PCR实现可靠的病原体DNA鉴定。仅限于实验室使用。不适用于兽医学诊断步骤。不为动物疾病的诊断、预防或治疗提供参考信息。 |
供应商 | Qiagen |