| 货号 | 762431 |
| 简介 | 从稳定在PAXgene Blood RNA Tubes里的血液中全自动、高通量纯化胞内RNA |
| 描述 | Performance PAXgene Blood RNA自动化操作流程提供高品质RNA，对同一供体具有高度可重复性（参见"High-quality RNA from different donors"）。由于产量与供体高度相关，个体产量可能不同。整合的DNase处理确保减少基因组DNA污染，一般少于0.1%（参见"Very low levels of genomic DNA"）。完全自动化的PAXgene Blood RNA操作流程获得的RNA产量与手工的PAXgene 96 Blood RNA操作流程相当（通常≥80%）。当大于95%的样本被处理时，从2.5 ml健康的人类全血（每毫升4.6 x 106 – 1.1 x 107个白细胞）中纯化的RNA产量一般≥3 µg。纯化的RNA可即用于下游应用，如定量real-time RT-PCR，检测不到RT-PCR抑制（参见"No RT-PCR inhibition detected）。系统误差很小，在一般的real-time RT-PCR实验误差范围内（参见"High intersystem reproducibility"）。 灵敏、标准化的操作流程可将样本间交叉污染的风险降到最低。从收集在PAXgene Blood RNA Tubes中的48个血液样本和48个水样本中纯化总RNA。样本以棋盘样式在96孔板中排布。使用PAXgene Blood RNA MDx Kit在BioRobot MDx全自动核酸分离纯化系统上纯化后，使用18s rRNA特异性引物和探针进行40个PCR循环，对所有样本都进行定量real-time PCR。血液样本的循环阈值（CT）在27.3到32.7间，而水样本经40个循环后检测不到RNA。 Principle 血液样本（2.5 ml）直接收集到PAXgene Blood RNA Tubes中，使用PAXgene Blood RNA MDx Kit进行RNA纯化。PAXgene Blood RNA Tubes含有专利配方的试剂，可快速稳定RNA。血液样本在PAXgene Blood RNA Tubes中可室温保存长达5天。PAXgene Blood RNA MDx Kit中提供的硅胶模技术可自动纯化RNA。获得的RNA可准确代表体内表达谱，适用于一系列下游应用。 Procedure 简单的纯化流程开始于在PAXgene Blood RNA Tube中离心沉淀核酸。加入蛋白酶K和优化的孵育缓冲液消化蛋白。指管在转移到BioRobot MDx全自动核酸分离纯化系统或BioRobot Universal System。装好缓冲液和塑料器皿后，在QIAsoft Operating System的指导下，BioRobot工作台可完成完全自动化的RNA纯化流程（参见"Automated PAXgene RNA purification procedure"）。纯化后，最后热处理洗脱液可提高在下游应用中的性能。总操作时间为3–4小时，最多25–30分钟手工操作时间。可选一次运行批处理48或96个样本的实验方案。Applications 纯化的RNA可即用于一系列下游应用，包括：
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| 说明书 | ||
| 供应商 | Qiagen |