| 货号 | 765134 |
| 简介 | 从固定并稳定在PAXgene Tissue Containers的组织中纯化总RNA |
| 描述 | Performance 使用PAXgene Tissue RNA Kit纯化的总RNA具有高品质和高纯度（参见"High-quality RNA from fixed tissue"和"RT-PCR of RNA purified from fixed tissue"）。基因组DNA污染减到最少，纯化的RNA可直接用于下游应用，无检测到的PCR抑制剂。可纯化所有大于200个核苷酸的RNA分子。该试剂盒不能富集大部分小于200个核苷酸的mRNA（如5.8S rRNA、5S rRNA和tRNAs，占总RNA的15–20%）。纯化的RNA大小与CsCl梯度离心获得的RNA大小相当，都不能有效沉淀小RNA。纯化小RNA，包括microRNA（miRNA），我们推荐使用PAXgene Tissue miRNA Kit。Principle 传统组织学中使用的组织固定方法在分子分析中用处很小。含有甲醛的固定剂会交联生物分子并修饰核酸和蛋白。在组织固定、保存和处理过程中，交联反应会导致核酸降解。由于交联反应不能完全去除，化学修饰会抑制敏感的下游应用，如定量PCR或RT-PCR。 PAXgene Tissue System通过稳定分子内容物并维持形态学，可对相同样本进行分子和传统病理学检测。系统包含组织收集装置（PAXgene Tissue Container用于收集、稳定、保存和运输组织样本），以及用于纯化总RNA、DNA或miRNA的试剂盒。PAXgene Tissue Containers可进行组织固定，用于病理学研究，同时可从相同样本中纯化高品质核酸用于分子分析。固定和稳定方法可保护组织形态学和核酸完整性，而不会像福尔马林固定方法会对组织中的核酸产生破坏性交联反应和降解。 为纯化总RNA，系统需要PAXgene Tissue Containers用于收集和稳定组织，之后用PAXgene Tissue RNA Kit进行RNA分离和纯化。容器和试剂盒为分子生物学分析提供了完整的预分析方案，从收集、固定、稳定到纯化高品质RNA。Procedure PAXgene Tissue Containers是预装有2种试剂的双腔容器。PAXgene Tissue Fix快速插入并固定组织。固定之后，组织从PAXgene Tissue Fix中转移到同一容器的第二个腔室PAXgene Tissue Stabilizer中。当组织在PAXgene Tissue Stabilizer中保存时，组织样本的核酸和形态学根据组织类型可在室温下稳定保持3–7天，在2–8°C下保存2–4周。在–15°C到–30°C条件下可保存至少3个月，而不会对组织形态学和核酸完整性造成负面影响。稳定的样本可用石蜡包埋，用于组织学研究。在石蜡包埋的前后都可从稳定样本中分离核酸。关于组织固定、稳定、处理和石蜡包埋的信息，参见PAXgene Tissue Container Product Circular。 PAXgene Tissue RNA Kit提供3种实验方案，可从固定并稳定在PAXgene Tissue Containers中的组织纯化总RNA。在结合缓冲液Buffer TR1中破碎并匀浆组织样本。离心取出残留的细胞碎片后，向裂解液中加入乙醇，为RNA结合提供合适的环境。样本加入到结合缓冲液Buffer TR1离心柱中，总RNA结合到膜上，污染物被有效洗去。在一二步漂洗步骤间，使用DNase I处理膜，可去除残留的DNA。漂洗之后，RNA在低盐洗脱缓冲液中洗脱并加热变性（参见"The PAXgene Tissue RNA procedure"）。 Applications 纯化的RNA可直接用于一系列下游应用，包括：
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| 供应商 | Qiagen |