QIAGEN的
virotypeASFV PCR Kit可提供针对来源于家猪或野猪的血清、血浆、EDTA全血、组织或拭子样本中ASFV DNA进行高度灵敏和特异性的检测方案。
通过QIAamp Viral RNA Mini Kit和
virotype CSFV RT-PCR Kit的联合使用,QIAGEN提供了全套并省时的针对ASFV和CSFV检测方案。使用
virotype ASFV PCR Kit中操作步骤,或者用于ASFV DNA和CSFV RNA进行同时扩增的PCR步骤并不会影响到检测的效果质量。virotype ASFV PCR Kit的高度灵敏性确保了对于单个样本或混合样本中病原体的早期检测。
分析的灵敏度是通过对于一系列梯度浓度的体外ASFV DNA进行测定而确定的。
展示出的检测下限为10个拷贝的ASFV DNA。
进一步的验证过程通过使用实验感染了Armenia、Sardinia以及Kenia05不同病毒株的ASFV阳性家猪及野猪样本而进行的(参见表1)。DNA分别提取自全血、脾脏、淋巴结、扁桃体、唾液腺、口咽拭子以及骨髓样本。
在检测样本的实验中,检测体系表现出了较高的灵敏度。而对于165例ASFV阴性样本的检测则得到了100%的特异性检测结果。此外,检测结果也没有发现存在同其他猪类病毒病原体的交叉反应性,如CSFV、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)以及猪圆环病毒2(PCV2)。
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 血液 | 21.10 | 18.99 | 22.59 | 19.86 | 22.45 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 骨髓 | 21.73 | 19.59 | 22.34 | 19.17 | 22.64 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 粪便 | 29.34 | 27.42 | 24.27 | 27.56 | 24.44 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 肺 | 24.01 | 20.62 | 22.20 | 20.42 | 22.50 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 淋巴结 | 24.47 | 21.90 | 21.40 | 23.22 | 21.38 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 口咽 | 33.40 | 31.09 | 29.10 | 31.20 | 29.37 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 唾液腺 | 25.69 | 23.78 | 24.33 | 23.60 | 24.68 |
Sardinia | Wild boar-1 | 8 | 扁桃体 | 23.46 | 21.24 | 21.14 | 21.11 | 21.25 |
Armenia | Wild boar-2 | 8 | 血液 | 16.22 | 16.84 | 20.91 | 18.54 | 20.90 |
Armenia | Wild boar-2 | 8 | 口咽 | no CT | 34.92 | 28.39 | 36.42 | 28.18 |
Kenia05 | Pig-1 | 14 | 血液 | 21.16 | 19.47 | 23.07 | 19.32 | 23.65 |
Kenia05 | Pig-1 | 14 | 骨髓 | 20.04 | 16.42 | 22.09 | 16.14 | 22.59 |
Kenia05 | Pig-1 | 14 | 粪便 | 26.66 | 25.67 | 24.98 | 25.73 | 25.37 |
Kenia05 | Pig-1 | 14 | 肺 | 25.48 | 21.83 | 23.36 | 21.53 | 23.69 |
Kenia05 | Pig-1 | 14 | 淋巴结 | 21.22 | 18.10 | 20.25 | 17.81 | 20.43 |