| 货号 | 207045 | ||||||||||||
| 简介 | 对珍贵的RNA样本进行无限次real-time PCR分析 | ||||||||||||
| 描述 | Performance QuantiTect Whole Transcriptome Kit确保所有转录子高度一致的扩增，这对于基因表达分析是必需的。所有mRNA转录子以相同的形式同时在5和3末端扩增（参见"Equal amplification of 5 and 3 regions"）。图"Preservation of transcript profile", 显示高度稳定的转录子，该图将分别应用QuantiTect Whole Transcriptome Kit全基因组扩增的cDNA和用逆转录酶制备的未扩增cDNA进行了对比。 可获得多至40 μg的可重复、高产量的cDNA（参见"Reproducible cDNA yields"）。能够进行无限次real-time PCR分析，并具有高度重复性的CT值（参见"Reliable real-time PCR analysis"）。此外，由于cDNA比RNA更稳定，可以存档用于以后的研究工作。
Principle 获得的生物样本量太少可能限制基因表达谱分析。使用QuantiTect Whole Transcriptome Kit可对少量珍贵的样品进行无限次real-time PCR分析。QuantiTect Whole Transcriptome Kit经优化，用于1 ng RNA或相当于约50个细胞RNA的全转录扩增，甚至可以用更少量的RNA，这些取决于RNA的品质和转录子的丰度。 QuantiTect Whole Transcriptome Kit含有逆转录酶、DNA聚合酶和优化的缓冲液及试剂，可对一个RNA样本的所有转录本进行扩增。此试剂盒整合了经质量验证的REPLI-g技术，通过非偏向序列扩增来合成cDNA。REPLI-g扩增采用Multiple Displacement Amplification（MDA）技术，应用独特加工的DNA聚合酶实现等温扩增（参见"Whole transcriptome amplification"）。该技术确保包括5’末端在内的所有转录区的同等扩增，从而获得可用于real-time PCR的足够多的cDNA。 Procedure 从总RNA开始经过3个步骤可获得大量代表了整个转录子的cDNA（参见"Procedure"）。首先，应用优化的含有T-Script Enzyme的逆转录混合物（含有随机引物和oligo-dT引物）将RNA转录为cDNA。用高效的连接混合物连接，然后用基于经验证的REPLI-g技术的扩增混合物扩增cDNA。Applications QuantiTect Whole Transcriptome Kit制备的cDNA可用于QuantiFast或Rotor-Gene Kits进行的real-time PCR分析，且可以储存用于以后的分析，但不适用于微阵列分析。QIAGEN提供REPLI-g Kits and Service，用于小量或珍贵样品的全基因组扩增。扩增高度一致，具有最小的序列偏好，可制备适合于基因分型和Comparative Genome Hybridization等应用的DNA。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |