| 货号 | 204445 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 使用序列特异性探针进行一步法real-time RT-PCR，用于基因表达分析 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Performance QuantiTect Probe RT-PCR Kit含有独特的RT-PCR缓冲液，可促使引物高度特异性的退火并与PCR模板结合。含有的HotStarTaq DNA Polymerase与其他聚合酶相比，具有严格的热启动（参见"Highly specific amplification"）。 QuantiTect Probe RT-PCR Kit包括HotStarTaq DNA聚合酶和独特的RT-PCR缓冲液，能够高灵敏度的定量检测低拷贝的RNA靶序列，在宽泛的范围内符合线性规律，实现准确定量检测（参见"High sensitivity and efficiency, and wide dynamic range"）。在同一个管中连续进行逆转录和PCR不会影响灵敏度，通过与两步法real-time RT-PCR的CT值对比可证明（参见"One-step RT-PCR with comparable performance to two-step RT-PCR — A"和"One-step RT-PCR with comparable performance to two-step RT-PCR — B"及下表）。
Principle QuantiTect Probe RT-PCR Kit含有优化的即用型预混液，可使用序列特异性探针对RNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。此试剂盒适用于各种类型的序列特异性探针，包括水解探针检测（如TaqMan和其他双标记探针）、FRET探针和Molecular Beacons。QuantiTect Probe RT-PCR Kit独特的PCR缓冲液含有浓度平衡的K+和NH4+，能促使特异性引物退火，获得高PCR特异性和灵敏度（参见"Specific primer annealing"）。此外，优化的逆转录酶混合液可从不同量的RNA模板合成cDNA，而HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动，可防止非特异性产物的形成。 QuantiTect Probe RT-PCR Master Mix含有dUTP，可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 （UNG）预处理，保证污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。
Procedure QuantiTect Probe RT-PCR Kit无需优化反应条件。只需将引物、探针和RNA模板加入到即用型RT-PCR预混液中，即可开始反应（参见"One-step RT-PCR"）。按照使用手册中的实验方案操作，即可快速获得可靠的结果，适用于各种real-time PCR仪。如果需要，可使用UNG进行预处理，去除上一反应残留的PCR产物。 Applications QuantiTect Probe RT-PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对RNA目标序列进行基因表达分析，包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时，我们推荐专门为快速PCR研发的Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |