货号 | 204345 | |||||||||||||||
简介 | 使用序列特异性探针进行两步法实时定量RT-PCR,用于基因表达分析 | |||||||||||||||
描述 | Performance QuantiTect Probe PCR Kit配合QuantiTect Reverse Transcription Kit可得到灵敏、可靠的结果(参见"High sensitivity and efficiency, and wide dynamic range")。独特的PCR缓冲液组分使QuantiTect Probe PCR Kit能够高灵敏度的定量检测低拷贝的DNA靶序列,在宽泛的范围内符合线性规律,实现准确定量检测(参见"Wide dynamic range in two-step RT-PCR")。与其他聚合酶相比,HotStarTaq DNA Polymerase具有严谨的热启动,进一步提高了PCR反应的特异性(参见"Highly specific amplification")。 PCR污染的主要来源是PCR产物中的残余DNA污染。在PCR前使用UNG预处理,可确保污染的PCR产物不会影响后续的PCR。QuantiTect Probe PCR +UNG Kit中经特别优化的UNG溶液配合经验证的PCR预混液可有效避免PCR产物污染,并对靶序列进行可靠的定量(参见"Effective UNG digestion"和"Wide dynamic range in real-time PCR")。 Principle QuantiTect Probe PCR Kit含有优化的即用型预混液,可使用序列特异性探针对cDNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。此试剂盒适用于各种类型的序列特异性探针,包括水解探针检测(如TaqMan和其他双标记探针)、FRET探针和Molecular Beacons。QuantiTect Probe PCR Kit独特的PCR缓冲液含有K+和NH4+,能促使特异性引物退火,获得高PCR特异性和灵敏度(参见"Specific primer annealing")。此外,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,可防止非特异性产物的形成。 QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 (UNG)预处理,保证污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。
Procedure QuantiTect Probe PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物、探针和cDNA模板加入到即用型PCR预混液中,即可开始反应(参见"Two-step RT-PCR")。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,以去除PCR产物中残留的污染。 为在两步法real-time RT-PCR中获得理想结果,我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并可去除基因组DNA污染。 Applications QuantiTect Probe PCR Kit可用于在各种real-time PCR仪上对cDNA目标序列进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐专门为快速PCR研发的Rotor-Gene Probe PCR Kit。 |
说明书 |
| |||
供应商 | Qiagen |