| 货号 | 204843 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 使用序列特异性探针进行多重一步法定量RT-PCR，用于基因表达分析 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Performance QuantiTect Multiplex RT-PCR Kit可灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列（参见"Detection of down to 10 copies of target RNA in duplex PCR"）。即使用4重检测法定量起始拷贝数相差达100,000倍的转录本也可获得理想的实验结果（参见"Comparable amplification in 4-plex PCR and singleplex PCRs"）。 通过在同一孔板或试管内同时定量分析靶基因和内源对照基因，可精确定量检测基因表达。使用QuantiTect Multiplex RT-PCR Kit时，靶基因在多重PCR中的CT值与其在单一PCR对照实验中CT值一致（参见"Comparable amplification in triplex PCR and singleplex PCRs"）。这说明不同的靶基因在同一个多重PCR反应体系中可被高效、高灵敏度地扩增而不相互干扰。 Principle 通过在同一孔板或试管内同时定量分析靶基因和内源对照基因，可精确定量检测基因表达。QuantiTect Multiplex RT-PCR Kit确保在多重一步法RT-PCR中一次成功（参见"QIAGEN multiplex kits"）。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。 在同一反应液中扩增内参和靶基因，可减少手工误差，提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex RT-PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子，可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火，提高PCR效率（参见"Unique PCR buffer"）。此外，优化的反转录酶混合液可从不同量的RNA模板合成cDNA，而HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动，防止非特异性产物的产生。
Procedure QuantiTect Multiplex RT-PCR Kit含有即用型预混液，无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案，并列有推荐的染料。如果需要，反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）（不提供）预处理，以去除PCR产物中残留的污染物。 可选预混液有或没有ROX染料的试剂盒，确保能在各种real-time PCR仪上使用（见表）。ROX浓度已优化，可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。
Applications QuantiTect Multiplex RT-PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对RNA目标序列进行基因表达分析。仪器包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时，我们推荐专门为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |