货号 | 204484 | |||||||||||||||||||||||||
简介 | 使用序列特异性探针进行一步法快速RT-PCR,并去除基因组DNA | |||||||||||||||||||||||||
描述 | Performance QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit能进行快速、灵敏的定量,甚至包括含有高度降解RNA的样本(参见"Highly efficient real-time RT-PCR detection of degraded RNA"),其基因组DNA残留量较高(参见"Efficient genomic DNA removal for accurate gene expression analysis")。Principle QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit含有特异性探针(如QuantiFast Probe Assays中的水解作用[TaqMan]探针),可对目标RNA进行快速、灵敏的扩增。在real-time RT-PCR开始前的孵育步骤可有效去除基因组DNA污染,确保RNA测量数据的准确性。基因组DNA的存在会导致CT值比真阳性值低,而出现假阳性信号。 参照和目标基因同时扩增,而不是在不同反应中分别扩增,这减少了人工操作误差,增加了基因扩增的可靠性。QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit在标准及快速循环仪上宽动态范围内均可获得快速、高灵敏度结果(参见"QIAGEN multiplex kits")。专门研发的快速PCR缓冲液包含创新的添加剂Q-Bond,显著减少了变形、退火、延伸时间(参见"Fast primer annealing")。通过使用专门的RT-PCR缓冲液,可确保一步法RT-PCR的高特异性和灵敏度,且省去了进行优化的时间。该缓冲液包含了K+和NH4+平衡组合,可加快特定引物的退火过程,且独特的Factor MP成分可稳定已结合的引物(参见"Unique PCR buffer")。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase在一定温度下才会活化,防止了非特异性产物的生成。该试剂盒含有优化的RT预混液,可在20分钟内完成cDNA合成。该试剂盒含有两管不同浓度的ROX校准染料。ROX的浓度为优化浓度,因此可通过自动数据分析,实现对低拷贝RNA的检测。
Procedure QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit含有即用型预混液,可减少优化试剂和反应条件的时间。按照操作手册中的实验方案进行操作,即可快速获得可靠结果(参见"QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit procedure")。 QuantiFast Probe Assays是初步设计的使用水解作用探针检测的全基因分析。QuantiFast Probe Assays与QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit联合应用于单重或多重一步法qRT-PCR,以获得可靠结果。 Applications QuantiFast Probe RT-PCR Plus Kit非常适合用于对多种来源的样本包括FFPE组织样本和降解的RNA样本进行基因表达分析。该试剂盒可用于快速实时定量PCR分析仪和标准实时定量PCR分析仪,包括QIAGEN、Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |