用于对突变进行准确、可靠的多重PCR分析

Performance

Type-it Mutation Detect PCR Kit优于其他供应商的试剂盒，确保可靠的突变分析。该试剂盒专门研发并经功能验证，可用于对缺失或插入等突变进行多重PCR分析，也可检测遗传修饰的有机体或微生物（参见"Sensitive detection of a mutated cancer-related gene）。该试剂盒也适合用作商业化SNP检测PCR体系的预扩增方法，如Applied Biosystems提供的SNaPshot体系（参见"Superior preamplification of SNPs"）。

Principle

Type-it Mutation Detect PCR Kit基于专有的QIAGEN Multiplex Technology，以即用型预混液形式提供。预混液含有浓度经优化的HotStarTaq Plus DNA Polymerase、MgCl₂、dNTPs和一种创新的PCR缓冲液，专用于对突变进行多重PCR检测，或是对基因组SNP位点进行预扩增。该试剂盒还包含创新的添加剂Factor MP，以及平衡比例的盐和添加剂。这些组分使反应中的所有引物都具有相当的退火和延伸效率（参见"Stable and efficient annealing"），可平行地对所有片段进行可靠的高产量多重扩增。该试剂盒包括专门用于检测突变的操作流程，以及对模板量、循环数、PCR条件和不同下游分析平台仪器细节的建议，分析平台包括琼脂糖凝胶、毛细管测序仪、Agilent Bioanalyze和QIAxcel Advanced System。

预混液中所有组分配合专有的操作流程，可平行地对所有片段进行高特异性扩增。后续分析简单、直接，可在琼脂糖凝胶、自动化电泳仪上进行，也可进行高分辨率毛细管测序。

Type-it Mutation Detect PCR Buffer

Type-it Mutation Detect PCR Buffer确保高级别多重实验中的所有扩增子具有相当的扩增效率，可整合多个突变靶点，不会丢失任何突变靶点的扩增效率。与常规PCR试剂不同，Type-it Mutation Detect PCR Buffer含有特别研发的、比例平衡的盐和添加剂，确保反应中所有引物的退火和延伸具有同等的效率。KCl和(NH₄)₂SO₄独特的结合比例，使PCR缓冲液与常规PCR缓冲液相比，可在更宽范围的退火温度和Mg²⁺浓度下提供严格的引物退火条件。极大的减少通过改变退火温度或Mg²⁺浓度的PCR优化过程，有时甚至不需要。通常使用的多重PCR优化步骤几乎不需要。缓冲液中还含有合成的Factor MP（参见"Stable and efficient annealing"），不论引物序列如何都可进行有效的引物退火和延伸。Factor MP可提高DNA模板处的引物浓度，稳定特定结合的引物。

Q-Solution

Type-it Mutation Detect PCR Kit提供Q-Solution。这种创新的PCR添加剂通过修饰DNA的熔解行为，便于扩增难扩增的模板。使用这种独特的试剂常常能完成或改进不理想的PCR。与DMSO和其他PCR添加剂不同，Q-Solution可在多种引物-模板体系中使用特定工作浓度，而不会产生毒性作用。

CoralLoad Dye

Type-it Mutation Detect PCR Kit提供CoralLoad Dye（参见"CoralLoad Dye"），这种染料含有一种胶上样试剂和两种胶示踪染料，提高移液的可见性，便于估计DNA迁移距离及优化琼脂糖凝胶电泳时间。在多重PCR反应中使用CoralLoad Dye，扩增产物可直接上样到琼脂糖凝胶或QIAxcel Advanced System中，无需提前加入上样缓冲液。CoralLoad染料不会干扰大部分下游酶应用。但是，为获得可重复性的结果，建议在进行酶处理前纯化PCR产物。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　如果使用毛细管测序仪进行检测，不能使用CoralLoad Dyes。

Procedure

Type-it Mutation Detect PCR Kit包括专有的、特异性的操作流程，可同时扩增和后续检测含突变的位点或SNPs，保证在常规分析中获得可靠结果，也可用于新检测的建立。可在室温下建立反应，确保更大的便利性和易用性。

快速、简单的方法，获得可靠的基因分型结果

Type-it Mutation Detect PCR Kit确保快速、简单的多重分析构建，以获得准确、可重复的基因分型结果。无论检测易位、缺失、插入或预扩增基因组位点用于SNP分析，如SNaPshot（Applied Biosystems），只需加入模板和引物后，根据优化方案开始热循环程序即可。反应混合物含有突变特异性多重PCR所需的所有试剂，与目前的其他方法相比，无需冗长的优化步骤即可获得准确的结果（参见"Successful multiplex PCR-based genotypic analysis"）。

简单的操作流程，节约时间和成本

有些研究需要分析疾病相关的某个基因的很多不同突变（如缺失、易位或插入），如果进行单重或低级别PCR分析，需要众多的PCR反应，增加时间和成本。Type-it Mutation Detect PCR Buffer确保高级别多重实验中的所有扩增子具有相当的扩增效率，可整合多个突变靶点，大大节约时间和成本（参见"Sensitive detection of a mutated cancer-related gene"）。此试剂盒含有专门的、应用特异性的操作流程，可同时扩增和后续检测含突变的位点或SNPs，保证在常规分析中获得可靠结果，也可用于新检测的建立。

可靠的SNP预扩增 

Type-it Mutation Detect PCR Kit非常适合对SNPs进行多重PCR预扩增（如来自Applied Biosystems的SNaPshot系统）。此试剂盒优于来自其他供应商的试剂盒，可持续获得可靠的结果，无需繁琐的优化步骤（参见"Superior preamplification of SNPs"）。

Applications

Type-it Mutation Detect PCR Kit可用于分析缺失、插入、重复和易位的突变，以及进行SNP预扩增（如SNaPshot Multiplex Kit）。该试剂盒可用于多种研究领域：

• 疾病基因位点的分型
• 转基因生物分析
• 转基因植物或动物的分型