| 货号 | 208152 |
| 简介 | 基于SYBR Green I的一步法qRT-PCR用于基因表达分析 |
| 描述 | Performance QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit使用两步法的热启动操作流程。这一操作流程包括，在50°C下热激活HotStaRT-Script逆转录酶，在95°C下热激活PCR聚合酶。在低于50°C时，HotStaRT-Script和一种RT-Blocker分子形成复合体，进入失活状态。当温度达到50°C时，复合物分解， 释放出活性状态的HotStaRT-Script酶。QuantiNova DNA Polymerase在QuantiNova Antibody和一种新型添加剂QuantiNova Guard的作用下一直处于失活状态，其中QuantiNova Guard起着保持复合物稳定性的作用。这种设计使得热启动操作流程的严格程度进一步提高，避免了非特异性退火引物延伸或形成引物二聚体。温度达到95°C后两分钟内，QuantiNova Antibody和QuantiNova Guard发生变性，QuantiNova DNA Polymerase激活，PCR扩增开始。这一独特的两步法热启动操作流程使得反应构建工作可在室温下稳定保持2小时以上，消除了假阳性结果出现的可能，并可实现体系构建的自动化。新研发的内质控是一种成分明确的转录本（RNA分子），可直接加入您的样本并被同时逆转录为cDNA。这种内质控可以直接反应仪器或相应试剂是否正常，实验构建的体系是否存在错误，以及反应体系中是否存在抑制剂。由于内质控的表现和真实转录本相似，因而可用来确认逆转录和PCR扩增过程的成功与否。 QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit随附的预混液中包含一种惰性蓝色染料，这种染料不会干扰逆转录或real-time PCR进行，但可增加试管或板孔中液体溶液的可见性。QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer包含一种惰性黄色染料，将使用QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer稀释的模板核酸加入预混液后，溶液的颜色会从蓝色变为绿色，从而通过颜色变化指示出加样和反应构建正确与否。 QuantiNova DNA Polymerase以及RT-PCR缓冲液的独特配方组合，使您可以灵敏地定量检测低拷贝RNA靶标，并且可以在任何一台普通PCR仪上进行宽线性范围的精确定量。 Principle QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit包含经优化的即用型预混液，可通过SYBR Green I荧光染料进行高度特异、灵敏的实时定量检测RNA靶标。该试剂盒包含一种独特的K+和NH4+离子平衡PCR缓冲液，可以提高引物退火特异性，实现检测的高特异性和高灵敏度。此外，HotStaRT-Script合成cDNA可兼容的模板量范围极广，同时，QuantiNova DNA Polymerase具有严格的热启动程序，避免了非特异性产物的生成。独特的两步法热启动流程使得体系构建可在室温下稳定保持２小时以上，并可支持自动化体系构建。内置的可视化显色对照可用来指示模板是否已加入反应体系，从而避免实验操作过程中的加样错误。 检测cDNA的合成情况，可以验证实验结果的可重复性。我们新研发的内质控是一种序列已知的转录本（RNA分子），可选择性加入到您的样本中并被同时逆转录为cDNA。其可直接反应仪器或相应试剂是否正常，实验构建的体系是否存在错误，以及反应体系中是否存在抑制剂。 Procedure QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit使您不需要对反应条件进行优化，省去了大量麻烦，节省了时间。只需将引物、RNA模板和逆转录混合物加入即用型SYBR Green RT-PCR预混液，反应即可开始。根据QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit说明书内的实验方案操作，即可在任意一台real-time PCR仪上迅速获得可靠的结果。Applications QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit可用于在任何一台real-time PCR仪上检测RNA靶标的表达水平。其适用的PCR仪包括QIAGEN的Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪，以及Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent等公司的仪器。 |
| 说明书 | ||
| 供应商 | Qiagen |