| 货号 | 204741 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR，用于基因表达分析 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Performance QuantiTect Multiplex PCR Master Mix确保在多重扩增反应液中PCR产物扩增的效率和灵敏度与单一扩增反应中相同（参见“三重和单一PCR反应的CΤ值比较”、"Comparable results with 4-plex and singleplex PCRs"和"Equivalent CT values in triplex PCR and singleplex PCR"）。
此试剂盒可检测低至10个拷贝数的靶基因，即使同一反应液中对照基因的拷贝数是106倍以上（参见"Detection of 10 copies of target gene with excess reference gene"、"Successful quantitative triplex qPCR of low and high abundance targets"和“对高和低丰度靶基因的进行成功的三重real-time PCR检测”）。
Principle 使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功（参见"QIAGEN multiplex kits"）。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。 在同一反应液中扩增对照和靶基因，可减少操作误差，提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子，可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火，提高PCR效率（参见"Unique PCR buffer"）。此外，HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动，可防止非特异性产物的形成。 QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP，可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）预处理，保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。
Procedure QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液，无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案，并列有推荐的染料。如果需要，反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）（不提供）预处理，以去除之前反应残留的PCR产物。 可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒，确保能在各种real-time PCR仪上使用（见表）。ROX浓度已优化，可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。
我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA，可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA，并去除基因组DNA污染。 Applications QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析，包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时，我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |