货号 | 970480 |
简介 | 基于序列定量分析EGFR基因中的突变 |
描述 | Principle EGFR Pyro Kit用于实时定量检测人EGFR基因编码子719、768、790、858和861的突变,以及外显子19的缺失和复杂突变,在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上采用焦磷酸测序技术进行分析。EGFR基因可编码表皮生长因子受体(EGFR)蛋白。EGFR基因酪氨酸激酶结构域的突变能够促进肿瘤的生长和增殖。在美国有近10%的非小细胞肺癌患者发现了EGFR基因突变,在东亚该比例达到35%。除此之外,6%的脑瘤患者也发现了EGFR突变。 可检测以下种类的突变:
Procedure 该试剂盒包含4个PCR实验:第一个用于检测编码子719的突变(外显子18);第二个用于检测编码子768和790的突变(外显子20);第三个用于检测编码子858–861的突变(外显子21);第四个用于鉴定外显子19的缺失突变。对这4个片段分别进行PCR扩增,然后测定特定区域的核酸序列(参见"Illustration of the EGFR assay")。其中包含编码子768和790的扩增子被分为两个序列反应。使用该法进行定量和定性分析时,特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。使用针对外显子18、19、20和21的引物对4个片段PCR扩增后,将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上设置程序和运行程序对样品进行分析。推荐使用EGFR Plug-in Report进行分析。该报告确保使用正确的LODs和分析的不同序列可自动检测所有突变和缺失。也可在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上使用其他分析工具进行分析(参见"Pyrogram trace of a normal genotype in codon 719","Pyrogram trace of a normal genotype in codon 768","Pyrogram trace of a normal genotype in exon 19"和"Pyrogram trace of a GGAATTAAGAGAAGC deletion in exon 19")。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测外显子19的各种缺失和其他外显子的稀有突变。 Applications EGFR Pyro Kit用于检测人EGFR基因编码子719、768、790、858和861的突变,以及外显子19的缺失和复杂突变。可检测以下种类的突变:
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说明书 | |||||||
供应商 | Qiagen |