货号 | 59305 |
简介 | 用于高度精确的甲基化特异性PCR(MSP),无需优化 |
描述 | Performance QIAGEN的EpiTect MSP Kit含有经基因工程改造的全新聚合酶HotStarTaq d-Tect,该聚合酶有高度的PCR特异性(参见"Sensitivity of HotStarTaq d-Tect")。该聚合酶只扩增在3末端(扩增起始点)与靶向DNA完全吻合的引物,能够分析单个的CpG位点。与野生型DNA聚合酶不同,野生型DNA聚合酶通常忽视3端的错配、扩增不吻合的引物,产生非特异性、假阳性甲基化结果(参见"Increased mismatch discrimination")。Principle EpiTect MSP Kit简化了新型甲基化特异性PCR分析的流程。甲基化特异性PCR引物的设计通常比较困难,这是由于每个引物需要覆盖几个CpG位点。因此在CpG岛中不能检测单个的CpG位点。由于HotStarTaq d-Tect Polymerase对一个引物只需要单个碱基错配,可大大简化MSP的引物设计,即使是单个CpG位点也可确保高灵敏的甲基化分析(参见"Single base discrimination")。 Procedure EpiTect MSP Kit以预混液形式提供,确保快速方便的反应体系构建。HotStarTaq d-Tect Polymerase在室温条件下没有聚合酶活性,这就避免了在低温条件下生成错误的产物或引物二聚体。在95°C条件下孵育10分钟,激活HotStarTaq d-Tect Polymerase,这个步骤可以整合入已有的热循环程序中。 表观遗传学中标准化的工作流程生物学和医药研究的很多领域中,尤其是肿瘤学、干细胞研究和发育生物学研究中,获得表观遗传学信息是首要任务。但是,由于缺乏提供可重复性数据的标准化方法,尤其是样本材料的限制,分析DNA的甲基化变化非常困难。QIAGEN最新推出的EpiTect方案,建立了从DNA样本收集、稳定和纯化到亚硫酸氢盐转化和real-time或终点式PCR甲基化分析或测序的标准化预分析和分析方案(参见"Standardized Workflows in Epigenetics")。 Applications EpiTect MSP Kit专用于高度特异性的终点法PCR甲基化分析。 |
说明书 |
| ||
供应商 | Qiagen |