货号 | 218540 |
简介 | 使用miScript PCR系统以及定制的实验平板对成熟的miRNA分子进行定量 |
描述 | Performance 使用miScript Primer Assays和miScript PCR系统对成熟miRNA分子进行检测,可确保得到可重复性、可靠的结果。由于很多miRNA分子的表达水平很低,敏感度是确保得到可靠数据的关键。miScript PCR系统具有出色的敏感度,可以检测到低至10个拷贝的miRNA分子(参见Accurate detection of as low as 10 miRNA copies)。仅需要10pg总DNA,就能够得到准确、可重复的miRNA数据(参见Broad dynamic range and high amplification efficiencies)。扩增效率高且稳定,因此能用∆∆CT方法准确地对多种miRNA分子进行表达分析。Principle miScript PCR 系统使用基于SYBR Green的real-time PCR技术,可对miRNA进行敏感、特异性的定量和分析。miScript PCR系统包含了将RNA转换成cDNA,以及后续检测miRNA的real-time PCR实验的所有步骤。为完成对成熟miRNA分子的检测和定量,miScript PCR系统使用如下组分: miScript II RT Kit — 这一试剂盒可实现简便的一步法cDNA合成。在检测上百个miRNA分子时,可以采用一次单独的cDNA合成反应。其所采用的双重缓冲液体系能够满足real-time PCR反应miRNA定量检测应用的独特需要。 miScript PreAMP PCR Kit和Primer Mixes — 这一试剂盒和引物的混合物能够对有限量的miRNA分子进行无偏的预扩增,以便进行后续的miRNA分析。 miScript SYBR® Green PCR Kit — 这一试剂盒包含了QuantiTech SYBR Green PCR 预混液和miScript通用引物。miScript通用引物为反向引物,可以结合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array,对miRNA分子进行检测。 miScript Primer Assay — miScript Primer Assays是用于检测成熟的miRNA分子的miRNA特异性正向引物,其采用了miRBase数据库中的最新信息。 Procedure 检测成熟的miRNA分子,需使用miScript II逆转录试剂盒中的miScript HiSpec缓冲液或者miScript HiFlex缓冲液,通过逆转录反应制备cDNA分子,并将其作为real-time PCR反应的模板分子。real-time PCR反应使用miRNA特异性的miScript Primer Assay(正向引物)和miScript SYBR Green PCR Kit进行。而miScript SYBR Green PCR Kit中包含了miScript通用引物(反向引物)和QuantiTect SYBR Green PCR预混液。为检测其它的非编码RNA,需使用miScript II RT Kit中的miScript HiFlex缓冲液,通过逆转录反应制备cDNA,并将其用作real-time PCR反应的模板分子。real-time PCR反应使用miScript Primer Assay(正向引物)和miScript SYBR Green PCR Kit进行,后者包含了miScript通用引物(反向引物)和QuantiTect SYBR Green PCR预混液。如果暂无针对您感兴趣的小RNA的miScript Primer Assay,我们亦可根据您的要求定制。 Applications miScript Primer Assays Plates作为miScript PCR System的一部分,用于:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |