货号 | 334111 |
简介 | 用于免疫共沉淀实验中对用户选择的基因组合进行定量检测 |
描述 | Performance 使用SYBR® Green-based real-time PCR 技术,EpiTect ChIP qPCR Arrays表现出高灵敏度、高特异性和可重现性。 可重现性完整的EpiTect ChIP qPCR Array系统在技术重复、批次及仪器上都表现出高度可重现性。这种一致性能保证可靠检出生物样品间基因组DNA沉淀物的差异(参见"Consistent intra- and inter-plate performance"和"Consistent performance with different amounts of DNA, instruments, or handling conditions")。 特异性、准确性ChIP-qPCR检测ChIP qPCR Array检测技术的前提是统一、高效的PCR扩增效率,允许待测基因组DNA ChIP沉淀物之间相互比较。专利化ChIP-PCR引物设计法则、经实验严格验证的EpiTect ChIP qPCR Assay及高性能的RT2SYBR® Green Mastermix联合使用,保证了EpiTect ChIP qPCR Arrays的高性能(参见"Uniform amplification efficiency and specific PCR detection")。 分析整个基因启动子的组蛋白编码EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays的应用之一是监测基因的不同组蛋白修饰。EpiTect ChIP Custom qPCR Array可快速绘制CDKN1A基因转录起始位点(TSS)附近的组蛋白修饰图谱(参见"Monitoring of differential histone modifications")。 Principle 基因表达调节要求基因组DNA与蛋白如转录因子、转录辅激活因子、辅阻遏物及经修饰的组蛋白之间的相互作用动态可控。核染质免疫共沉淀(ChIP)是一种重要的方法,可用于研究发现新的体内蛋白和DNA间的结合及对已知体内蛋白和DNA间的结合速度及强度进行研究。实验最后的化学交联作用共价捕获并冻结蛋白和DNA相互作用。采用声波降解法将染色质剪接成大小可控制的片段用于灵敏检测特定基因组DNA序列。标准的免疫共沉淀法靶向目标蛋白及与其结合的DNA。交联逆转及DNA纯化后对特定序列进行real-time PCR检测,随后对蛋白结合DNA定量。 EpiTect ChIP Custom qPCR Array含有一套优化的real-time PCR引物分析,可根据特定研究目的定制相关基因,在96孔板或384孔板分析体内蛋白和DNA相互作用。EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays使用的EpiTect ChIP qPCR Assays是基因组范围、实验室验证的real-time PCR工具,用于分析人体、小鼠和大鼠样本的启动子区域。EpiTect ChIP Custom qPCR Array进行的ChIP DNA分析具有real-time PCR的灵敏度以及ChIP-on-chip的多基因组位点分析能力。可在real-time PCR仪上以96孔板或384孔板的形式,同时分析多个基因组位点和样本。与相应的RT2 SYBR Green qPCR Mastermix配合使用能保证EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays的性能。 完全定制芯片EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays可选一系列96孔板和384孔板规格(参见"EpiTect ChIP Custom qPCR Array formats")。也可选其他不同规格。请咨询获得更多信息以及订购。EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays从订单确定到制造、实验室验证并运输,这个过程需要2–3周。 Procedure 分别将内源性DNA片段、特异性抗体、IgG对照及ChIP DNA片段与相应的即用型RT2 SYBR Green qPCR Mastermix混合,将片段分成等体积放入各自板上的孔中,然后用推荐的real-time PCR循环程序进行分析。 数据分析基于∆CT法以计算特异性抗体及对照ChIP DNA片段与内源性DNA片段的聚集百分率获得原始数据。易于使用的的Excel数据分析模板使分析过程简化。 Applications EpiTect ChIP qPCR Arrays可用于癌症、免疫学、干细胞和毒理学的研究、以及生物标志物的发现和验证,也可用于基因表达变化的调控机制研究。EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays能够可靠分析和转录因子、共调节因子、经修饰或未修饰的组蛋白和其他DNA结合蛋白相关的基因组序列。 EpiTect ChIP Custom qPCR Arrays也可高效的应用于:
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供应商 | Qiagen |