货号 | 337801 |
简介 | 用于定制分析拷贝数变化和改变 |
描述 | Performance 使用real-time PCR在DNA样本中进行拷贝数变化检测时,两个因素很关键:real-time PCR分析的表现和对DNA起始量的可靠标准化。在Custom qBiomarker Copy Number PCR Array上的每个qBiomarker Copy Number PCR Assay都经湿法验证,有几个因素影响real-time PCR结果的准确性:特异性、宽动态范围和统一的高扩增效率。分析质量的实验室验证确保qBiomarker Copy Number PCR Assays获得可靠结果。 qBiomarker Copy Number PCR Assays可准确鉴定细胞学方法发现含有染色体畸变的细胞系中的非整倍体。检测X染色体上的AR和MECP2,可准备定量含有1、3、4拷贝X染色体细胞系的基因拷贝数。 Custom qBiomarker Copy Number PCR Arrays使用qBiomarker Multicopy Reference Copy Number PCR Assay (MRef)对DNA起始量进行出色的标准化。单拷贝参照基因(如RNase P)在癌细胞系中会产生不可靠的标准化。相比起来,MRef分析可提供准确的标准化,产生更可靠地结果。总之,对芯片上的每个qBiomarker Copy Number PCR Assay的实验室验证,以及MRef分析提供的优良的DNA起始量标准化,可确保准确、可靠的结果。 Principle 每个Custom qBiomarker Copy Number PCR Array含有一组qBiomarker Copy Number PCR Assays,分析一套严格筛选的的通路或疾病相关的GOIs或ROIs。每次分析都重复四次,以提高统计分析时拷贝数结果的准确性。芯片有96孔板、384孔板和Rotor-Disc转子规格,可满足您的实验需求。 所有qBiomarker Copy Number PCR Assays都设计在基因组的独特区域。每个芯片都含有一个多拷贝参照分析,即qBiomarker Multicopy Reference Copy Number PCR Assay (MRef)。参照分析检测人体基因组中出现超过40次的稳定序列,其拷贝数不会受自身基因组变化影响或影响很小。检测包含参照分析可运用ΔΔCT法对特定靶标进行准确的拷贝数分析或相对拷贝数变化分析。 qBiomarker Copy Number PCR Array的规格和操作流程的简便性使常规的拷贝数分析可在任何有real-time PCR仪的实验室进行。 Procedure 完成qBiomarker Copy Number PCR Array操作的第一步是从新鲜或冷冻样本中分离基因组DNA,或是从福尔马林固定石蜡包埋切片中提取DNA(推荐使用QIAGEN QIAamp DNA Mini Kit或FFPE Tissue Kit)。如果DNA样本量很少,从新鲜或冷冻组织中提取的DNA可使用QIAGEN REPLI-g UltraFast Kit统一扩增。将DNA与合适的qBiomarker SYBR® Green Mastermix混合后,等分后加入到同一qBiomarker Copy Number PCR Array孔板的每个孔中,孔板含有预分配的位点特异性引物。使用real-time PCR确定特定样本的拷贝数状态,使用ΔΔCT法将检测样本与参照基因组对比进行分析。在芯片体系构建之前可选择性进行DNA样本质量控制步骤。 Applications Custom qBiomarker Copy Number PCR Arrays十分适合于对客户选择的一组基因进行准确的拷贝数变异分析,例如SNP或aCGH数据验证。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |