货号 | 54104 | ||||||||||||||||||||||||||||||
简介 | 从各种动物样本中纯化病毒RNA、DNA和细菌DNA | ||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | Performance 数据显示,采用手动和自动实验方案纯化病毒RNA可得到同样高的纯化效率(参见"Comparison of manual and automated processing.")。牛血清中掺入来自细胞培养基的病毒颗粒。样本用牛血清按1:10倍比稀释,两个同样的样本用QIAamp cador Pathogen Mini Kit手动纯化或在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化。使用QuantiFast Pathogen RT-PCR +IC Kit,配合靶标特异性引物和探针检测病毒RNA。 试验中和试验间的高可重复性表明操作流程十分灵敏(参见"High repeatability of nucleic acid isolation.")。不同动物的全血样本中掺入来自细胞培养基的哦病毒颗粒,然后在-20°C冷冻。使用QIAamp cador Pathogen Mini Kit在不同的三天对相同样本进行三次重复处理。使用QuantiFast Pathogen RT-PCR +IC Kit,配合靶标特异性引物和探针检测病毒RNA。 此试剂盒也可从动物样本中成功纯化细菌DNA,见图"Successful isolation of bacterial DNA"。不同动物样本掺入革兰氏阴性或革兰氏阳性菌并预处理(参见"Pretreatments for the QIAamp cador Pathogen Mini Kit protocol"),然后在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化。成功纯化细菌DNA。使用QIAgility对两个细菌靶标通过反应混合液建立平行的PCR反应体系,使用QuantiFast Pathogen RT-PCR +IC Kit,配合靶标特异性引物和探针扩增细菌DNA。 Principle QIAampcador Pathogen Mini Kit整合了几个基于离心柱技术的样本制备试剂盒的特点,可从动物体液和组织样本中纯化病毒RNA、DNA和细菌DNA。离心柱操作流程使用优化的缓冲液和酶,可裂解样本并稳定致病菌核酸。RNA和/或DNA结合到QIAamp硅胶膜上,污染物穿过。漂洗缓冲液可完全去除PCR抑制剂,如二价阳离子和蛋白,再用Buffer AVE洗脱得到纯化的致病菌核酸。 使用QIAampcador Pathogen Kit从动物样本中纯化的致病菌RNA和DNA适用于real-time PCR和RT-PCR等下游应用。 与基于硅胶膜技术的其他试剂盒相比,QIAampcador Pathogen Mini Kit可处理多至200 µl未稀释的全血样本,不会堵塞滤器。见表“QIAamp cador Pathogen Mini Kit的主要特点”。
Procedure 大部分常见的液体样本都可使用主要的操作流程直接处理,包括裂解、结合、漂洗和洗脱步骤,详见“原理”部分。 组织样本和含难裂解细菌的样本需要适当的预处理(见表“QIAampcador Pathogen Mini Kit操作流程的预处理”)。预处理后,样本可按照液体样本的操作流程处理(参见"Processing of various sample types and targets"),可手工处理或在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化处理。
Applications QIAampcador Pathogen Mini Kit纯化的高品质病毒RNA、病毒DNA和细菌DNA适用于各种下游应用,包括real-time PCR和RT-PCR,用于:
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说明书 | ||
供应商 | Qiagen |