货号 | 217504 |
简介 | 从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中进行miRNA和总RNA的纯化 |
描述 | Performance 使用miRNeasy FFPE Kit纯化的总RNA和miRNA的产量和性能优于采用其他方法纯化的miRNA,如使用苯酚-氯仿抽提或者其他供应商的类似试剂盒(参见"Effective real-time RT-PCR quantification"、"Efficient RNA purification from FFPE tissues"和"Superior yields and performance")。Principle 用福尔马林固定的组织导致RNA-RNA和RNA-蛋白质交联,从而影响了RNA在下游应用中的表现。miRNeasy FFPE Kit提供了独特的裂解和孵育条件,可逆转福尔马林对RNA造成的交联。特别研制的的裂解缓冲液有效地将RNA从组织切片中释放出来,同时避免了RNA的进一步降解。裂解产物用DNase消化,然后优化的结合条件能够纯化含约18个以上核苷酸的所有可用的RNA。 Procedure 所有的miRNeasy FFPE操作流程都可在85分钟之内完成。优化的裂解缓冲液能够用蛋白质酶K消化样本裂解产物,仅需15分钟而且不损耗RNA产量。裂解后,在80°C下孵育样本15分钟逆转福尔马林交联。然后,在优化的DNase消化步骤中,用DNase Booster Buffer快速去除基因组DNA,并且用RNeasy MinElute离心柱纯化浓缩的RNA(参见"miRNeasy FFPE procedure")。由于RNA的洗脱体积仅有14–30 µl,在下游应用中可实现较小的反应体积。Applications miRNeasy FFPE Kit能够纯化包含miRNA的总RNA,并且适用于多种下游应用,如定量real-time RT-PCR。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |