| 货号 | 336851 | ||||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 用于灵敏检测各种哺乳动物细胞的信号活性 | ||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Performance Cignal Lenti Reporter Assays非常适合研究原代细胞、干细胞和难转染细胞株的细胞信号（参见"Determination of pathway activity in human primary cells"、"Notch signaling activity in rat glioma cells"、"Measurement of NFkB pathway activity"和"Advantage of using dual luciferase system"）。还可用于制备稳定细胞株（参见"Stable cell line generation"）和siRNAs的高通量筛选。Principle Cignal Lenti Reporter Assays独特的整合了转录因子报告基因技术和慢病毒技术。Cignal Lenti Reporter Assays含有多拷贝的特定转录因子结合部位和基本启动子元件，可表达报告基因（萤火虫荧光素酶或GFP）。 慢病毒是将含报告基因的载体转入大部分哺乳动物细胞（包括未分化细胞）的最有效工具。转导的慢病毒报告基因载体与细胞基因组DNA整合，可稳定、长期表达报告基因。 这些报告基因是功能基因组学和药物研发的有力工具，可检测通路活性。当候选药物、基因敲除（使用siRNA）、过表达（使用表达载体）或多肽激活或抑制通路时，荧光素酶或GFP报告基因活性可被调控，并能被快速、定量检测。 安全性Cignal Lenti Reporter Assays是转导即用型、不能复制的、基于HIV的VSV-G假慢病毒颗粒（参见"Cignal Lenti Reporter Assay"）。Cignal慢病毒颗粒使用安全。推荐按照Risk Group Level 2 (RGL-2)生物进行处理。按照所有发行的RGL-2准则进行操作和废物净化。建造BSL-2工作环境的详细要求可参见U.S. Department of Health and Human Services出版的Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories，第4版。 这些载体经设计改造后具有以下生物安全特征：
Procedure Cignal Lenti Reporter Assays可直接转导，无需构建或扩增慢病毒。这些载体非常适合对难转染细胞瞬时转导或制备通路传感细胞株。 难转染细胞株的瞬时通路调控研究使用Cignal Lenti Reporter Assay转导目标细胞。细胞通常培养24–48小时，以确保慢病毒整合。再用相应的生物试剂处理（siRNA、shRNA、化合物、病毒表达载体、蛋白或多肽）。根据处理条件，处理后18–36小时进行报告基因检测（萤火虫荧光素酶或GFP）（参见"Cignal Lenti Reporter Assay procedure"）。 制备稳定的通路传感细胞株使用Cignal Lenti Reporter Assay转导目标细胞。转导后，细胞用嘌呤霉素筛选，形成转导细胞的纯细胞群落。如果必要，可进行单细胞克隆，进而分离通路传感细胞株。这些通路传感细胞株可作为有用的细胞分析平台，用于后续筛选和机理研究。 Applications Cignal Lenti Reporter Assays适用于功能基因组学和药物研发，可检测各种哺乳动物细胞的信号活性。非常适合检测siRNAs、蛋白和小分子化合物的生物效应。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |