货号 | 74192 |
简介 | 96孔板纯化细胞中的总RNA,配有gDNA Eliminator板 |
描述 | Performance RNeasy Plus 96 Kit适用于多种细胞系,纯化的高品质RNA的Agilent RIN值接近10(参见"High-quality RNA")。此试剂盒可完全去除基因组DNA(参见"Effective genomic DNA removal"),在高度敏感的应用中可进行特定转录体的检测,如低丰度靶标的定量real-time RT-PCR分析。此外,从102–106个细胞中纯化的RNA可用于大范围的real-time RT-PCR定量分析(参见"Reliable RNA purification")。 Principle 细胞首先在含异硫氰酸胍的强变性缓冲液中裂解和匀质化,RNases立即失活以保证完整RNA的分离。裂解液再通过gDNA Eliminator 96孔板。96孔板与高盐缓冲液结合,能选择性、高效地去除基因组DNA。加入乙醇为RNA的结合提供合适的条件,样本加入到RNeasy 96孔板。特制的96孔板每个孔都含有硅胶膜,可特异性地结合裂解细胞中的RNA。 Procedure 使用RNeasy 96孔板可实现高通量RNA纯化。应用RNeasy 96孔板之前,细胞裂解液首先通过gDNA Eliminator 96孔板(参见"RNeasy Plus 96 procedure")。gDNA Eliminator 96孔板可在离心机(Centrifuge 4-16)上方便的操作。使用RNeasy 96孔板纯化RNA的过程是手动的,包含3个简单步骤:结合、洗涤和洗脱。板可在离心机(Centrifuge 4-16和Plate Rotor 2 x 96)或真空装置(QIAvac 96)和离心机上快速、方便的操作。在离心机上操作时最多可用2 x 106个细胞作为起始样本,在真空装置和离心机上最多可用1 x 106个细胞作为起始样本。操作流程可富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNA(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化包含miRNA等小RNA的总RNA。Applications 纯化得到的总RNA代表了细胞的转录状态,非常适用于对少量DNA污染敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA也能用于其他应用,包括RT-PCR、cDNA合成、Northern印迹、点印迹、狭缝印迹、引物延伸、poly A+ RNA筛选、RNase/S1核酸保护和微阵列。 96孔板规格纯化RNA十分方便,此试剂盒适用于高通量基因表达分析,如在以下领域:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |