货号 | 74324 |
简介 | 从人类唾液中稳定并纯化总RNA |
描述 | Performance RNAprotect Saliva Reagent中稳定的的唾液可在37ºC运输或储存1天,在室温(15–25ºC)下14天,在2–8ºC长达4周,或在–20ºC或–80ºC长期储存(参见"Effective stabilization of β-actin transcript")。从唾液中纯化得到的RNA作为血液RNA的替代品,可通过生物芯片分析研究口腔和系统疾病,还可通过real-time RT-PCR进行癌症RNA生物标记的基因表达分析(参见"Minimization of transcript degradation in saliva"和"Stable mRNA levels of cancer biomarkers")。Principle RNeasy Protect Saliva Mini Kit提供RNA保护和分离的完整解决方案,在一个试剂盒中完成从样本收集到RNA纯化的整个过程。经验证的RNeasy硅胶膜技术与具有RNA稳定特性的RNAprotect Saliva Reagent相结合,可纯化得到高品质、完整的RNA。唾液中除了含有细胞和游离的核酸外,还含有细菌。当唾液从供体收集并与RNAprotect Saliva Reagent混合时,RNA立即被稳定并避免了细菌不受控制的生长,从而保证下游基因表达分析结果可靠。样本经稳定后,RNeasy技术整合了异硫氰酸胍的严谨性与硅胶膜纯化的速度及纯度,简化了总RNA分离过程。当收集的样本在RNAprotect Saliva Reagent中稳定前,细菌中的RNA就已经降解,纯化得到的RNA与从培养细胞和动物组织中纯化的RNA相比,质量会相对更低。 Procedure 从供体采集到唾液后(200 µl)立即与RNAprotect Saliva Reagent混合以稳定唾液中的RNA。使用RNeasy Micro Kit可从稳定的唾液中纯化总RNA(参见"RNeasy Protect Saliva procedure")。首先对唾液样本进行离心,再向得到的沉淀中加入Buffer RLT。加入乙醇后,将样本加到RNeasy MinElute离心柱中,离心后RNA结合到膜上。DNase消化可去除基因组DNA残留,在数次洗涤步骤中可洗去污染物。高纯度RNA可在仅为14 µl体积的RNase-free纯水中洗脱下来。RNAprotect Saliva Reagent也能稳定DNA。还可选用实验方案从稳定的唾液中纯化DNA或RNA及DNA。Applications 使用RNeasy Micro Kit从稳定的唾液中纯化总RNA是血液分析的一种无侵害的替代方式。此试剂盒可用于鉴定RNA生物标记的研究:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |