货号 | 72022-QIAGEN | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
简介 | 从细胞和组织中纯化mRNA | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | Performance
Oligotex Direct mRNA kits可从100到1 x 108个细胞(表1)或10 mg到1000 mg组织(表2)中纯化mRNA。 从组织或细胞中纯化的Poly A+ mRNA适用于RT-PCR等下游应用(参见"RT-PCR of beta-actin mRNA")。
Principle
Oligotex Direct mRNA Kits只需1小时(使用快速实验方案只需30分钟)就可直接从细胞或组织中纯化 poly A+ mRNA。 Oligotex Direct mRNA纯化流程采用强变性裂解条件,快速形成RNase-free环境,以分离完整mRNA。Oligotex Direct mRNA Kits包含基于异硫氰酸胍的缓冲液,用于高效的细胞和组织裂解、蛋白变性和RNase失活,以保证分离完整的mRNA。Oligotex颗粒的优化设计、保护RNA的裂解液与杂交环境,实现了短时间内对poly A+ mRNA的回收率高于90%。使用Oligotex技术纯化poly A+mRNA无需进一步纯化,可即用于各种标准应用。 Oligotex树脂由大小均一(直径1.1 µm)的聚苯乙烯-橡胶颗粒组成,为完美的球状(参见"Oligotex particles and oligo-dT cellulose"),含有与表面共价结合的dC10T30寡核苷酸。Oligotex颗粒的大小、成分和表面结构经优化,均匀分散并需要最少的离心时间。颗粒形成稳定的悬浮液,为快速和高效结合多聚腺苷酸提供较大的表面积。高效率、高精确度的杂交确保通过快速、高效的杂交获得高纯度的poly A+ mRNA。Oligotex纯化过程将poly A+RNA流失降至最低,避免RNase降解风险,手动操作时间最少化。这些都使得该产品是同步处理多个样品的理想选择。 Procedure
经优化的Oligotex纯化流程方便简单(参见"Oligotex mRNA procedure"),将细胞或组织裂解液匀浆与Oligotex树脂共同孵育,简单离心收集Oligotex:mRNA复合物。试剂盒中提供的离心柱提供最方便的操作,同时为某些应用提供可选的批量操作流程。洗涤之后,用小体积量的Tris缓冲夜或水洗脱mRNA。无需乙醇沉淀。 Applications
使用Oligotex树脂纯化的Poly A+mRNA适用于多种下游应用,包括:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |