货号 | 73404 | ||||||||||||||||||||||
简介 | 从各种类型组织中纯化总RNA,配有gDNA Eliminator Solution | ||||||||||||||||||||||
描述 | Performance RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型的组织中得到高品质RNA,重复性好,适用组织包括脂肪组织和不易裂解的组织(参见下表)。不同物种和不同发育阶段的组织的纯化产量不同,尤其是脂肪组织。
使用real-time RT-PCR和QIAxcel体系分析纯化得到的RNA,表明这些RNA具有较好的完整性(参见"High-quality RNA")。gDNA Eliminator Solution和RNeasy技术可高效去除大部分基因组DNA污染,无需进行DNase处理(参见"Effective removal of genomic DNA")。 Principle RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型组织中纯化RNA,包括脂肪或不易裂解的组织。RNeasy Plus Universal Kits整合了苯酚/胍裂解技术和硅胶膜总RNA纯化技术。试剂盒中的QIAzol Lysis Reagent是一种由苯酚和硫氰酸胍组成的单相溶液,专为方便的裂解各种组织设计,并能抑制RNases的活性。高效的裂解以及通过有机抽提去除污染物,使RNeasy离心柱可用于处理更大量的组织。gDNA Eliminator溶液能有效去除基因组DNA污染,非常有助于DNA分离到中间相。 Procedure RNeasy Plus Universal操作流程易于进行,与苯酚/氯仿处理后回收相比,此方法更快、更有效,能得到更高纯度和产量的RNA(参见"RNeasy Plus Universal Mini and Midi procedures")。RNeasy Plus Universal Mini Kit可从50 mg组织中纯化RNA;RNeasy Plus Universal Midi Kit可从250 mg组织中纯化RNA。 可使用TissueRuptor、TissueLyser LT或TissueLyser II在QIAzol Lysis Reagent中进行样本匀浆。加入gDNA Eliminator Solution和氯仿后,匀浆离心分为水相和有机相。收集含有RNA的上层水相,加入乙醇,使用RNeasy离心柱纯化RNA。总RNA结合到离心柱膜上,苯酚和其他污染物被高效洗去。获得的高品质RNA可用RNase-free水洗脱下来。 该实验方案适用于富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNAs(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus Universal操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化包含miRNA等小RNAs的总RNA。 Applications RNeasy Plus Universal Kits纯化得到的RNA非常适用于对少量DNA敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA还可以用于其他应用。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |