货号 | 74624 | |||||||||||||||||||||
简介 | 从细胞中稳定并纯化总RNA | |||||||||||||||||||||
描述 | Performance 在进行基因表达分析实验时,如需在不同实验室间运输细胞,RNeasy Protect Cell Mini Kit是理想选择(参见表1)。
RNAprotect Cell Reagent中的细胞可在30ºC运输或储存1天,在室温(15–25ºC)下7天,在2–8ºC长达4周,在–20ºC或–80ºC长期储存(参见表2及"Effective inhibition of PMA induction"和"More reliable quantification of CD83 transcript")。
Principle RNeasy Protect Cell Mini Kit提供RNA保护和分离的完整解决方案,在一个试剂盒中完成从样本收集到RNA纯化的整个过程。经验证的RNeasy硅胶膜技术与具有RNA稳定特性的RNAprotect Cell Reagent相结合,可纯化得到高品质、完整的RNA。分选或培养的细胞与RNAprotect Cell Reagent混合,可立即稳定细胞内的RNA,确保下游的基因表达分析结果可靠。RNAprotect Cell Reagent可直接加入到细胞培养基或缓冲液中,不需洗涤或处理细胞(如胰酶处理)。或者,RNAprotect Cell Reagent可加入到细胞沉淀中。样本经稳定后,RNeasy技术整合了异硫氰酸胍的严谨性与硅胶膜纯化的速度及纯度,简化了总RNA的分离过程。 Procedure 分选或培养细胞与RNAprotect Cell Reagent混合可立即稳定细胞中的RNA。RNA稳定后,使用RNeasy Plus Mini Kit纯化总RNA(参见"RNeasy Protect Cell procedure")。离心RNAprotect Cell Reagent中的细胞,在Buffer RLT Plus中裂解并匀浆细胞沉淀。将裂解液通过gDNA去除柱,快速、高效去除基因组DNA。在裂解液中加入乙醇,然后使其通过RNeasy离心柱。离心后,总RNA结合在RNeasy离心柱膜上。污染物被高效洗去,在30–50 µl 不含RNase的纯水中洗脱得到高品质总RNA。纯化DNA或RNA及DNA需要另外购买QIAGEN DNA纯化试剂盒。更多细节可参考RNAprotect Cell Reagent Handbook。Applications RNAprotect Cell Reagent中保存的细胞可在室温下运输,无需在液氮中冷冻细胞沉淀,也无需干冰运输冷冻的细胞沉淀。RNeasy Protect Cell Mini Kit纯化得到的RNA非常适用于对低量DNA污染敏感的下游应用,如:定量real-time RT-PCR。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |