| 货号 | 1027415 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 每次对单个基因进行高效RNAi分析 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Performance 性能保证FlexiTube siRNA承诺提供一次性更换。如果订购了同一靶基因的多条FlexiTube siRNA，且至少2条未表现≥70%的基因抑制，QIAGEN将提供2条免费的额外siRNA，仅限一次。用户需要提供支持数据，以证明在适宜的转染条件下，siRNA未能成功地在mRNA水平抑制≥70%的靶基因。支持数据需要包括转染率数据，定量沉默数据以及≥70%的阳性对照抑制数据。该承诺自发货之日起6个月内有效。 数千条实验验证的siRNA数千条人类siRNA已经通过real-time RT-PCR验证，表现出至少70%的基因抑制。关于这些siRNA验证实验的详细信息和抑制水平信息，请参见GeneGlobe网站。这些经验证的siRNA均来自由QIAGEN科学家完成的世界最大规模的siRNA验证项目。如需该项目更多信息，请参见Krueger, U. et al. (2007) Insights into Effective RNAi Gained from Large-Scale siRNA Validation Screening. Oligonucleotides 17, 237. 领先的siRNA设计QIAGEN在siRNA设计中的进步性，确保其高度创新且精良的HP OnGuard siRNA Design，能提供高效特异的siRNA。根据来自RNAi试验的数据建立极大容量的数据库，并在此基础上利用神经网络技术进行siRNAs设计，然后使用先进的、非冗余序列数据库和同源分析工具，检查该序列与同一基因组内其他序列的同源性。HP OnGuard siRNA Design具有许多独特先进的特性（见下表）。
3 UTR/seed区域分析研究表明siRNA反义链源区域与非目的靶标mRNA3’非编码区的匹配（见表），可能导致脱靶效应。siRNA双链的反义链上的2-7位是源区域，包括6个碱基。由于siRNA可模拟miRNA的作用，类似的匹配会促进非靶标mRNA的减少。使用QIAGEN设计的siRNA，与源自miRNA，siRNA和鼠RefSeq数据库的3’非编码区专利产品相配合，可对3’UTR/seed区进行分析研究。将每个siRNA与这些序列比对，检查任何可能导致miRNA类脱靶效应的同源序列。 siRNA源区域所有6个碱基与无关靶标3’非编码区序列完全匹配是常见情况，且无需除去这种siRNA。更罕见的是siRNA序列中出现源区域与10个或更多碱基同源匹配的情况，这种同源性很有可能导致脱靶效应，而这些siRNA可能因为与非靶标基因表现出更高的同源性而被弃用。 对于一些靶位点，很难选择到完全非同源性的siRNA。对于这种情况，非相关基因的EntrezGene ID可能是GeneGlobe提供的siRNA的非靶标基因。对这种类型同源性的关注并不意味这些基因一定会受到siRNA的影响，然而如有必要，后续分析中可以认定上述基因为潜在的非靶标基因。 Principle FlexiTube siRNA提供冻干粉形态的siRNA，最小订购规格为1 nmol（最少订购4条siRNA），经济实用，还提供5 nmol和20 nmol的规格。 FlexiTube GeneSolution是针对特定基因的最佳解决方案 只需将详细的人类或小鼠基因信息输入GeneGlobe网站，即可获得适合目标基因的高效RNAi解决方案。搜索结果将显示FlexiTube GeneSolution，每个基因推荐4条1 nmol的siRNA。已发表的文献推荐进行重复性实验，以确保RNAi实验结果（Echeverri, C.J. et al. (2006) Minimizing the risk of reporting false positives in large-scale RNAi screens. Nat. Methods. 3, 777; Echeverri, C.J. and Perrimon, N. (2006) High-throughput RNAi screening in cultured cells: a user’s guide. Nature Reviews Genetics 7, 373）的准确性。在重复性实验中，使用靶定同一mRNA不同区域的不同siRNA来降低脱靶效应。siRNA交叉沉默转录物的具体型可能诱导脱靶表现型。由于该表现型直接来源于siRNA序列，因此不同序列siRNA共享同一序列来源脱靶效应的可能性非常低。使用多个不同siRNA确认一个表现型，以证实siRNA特异性的方法易于使用，且十分可靠。使用FlexiPlate GeneSolution可开展人类和小鼠基因的重复性实验。QIAGEN推荐对每个基因使用siRNA，如此则实验所需的最佳解决方案将触手可及。 提供siRNA的完整序列信息所有siRNA序列信息在购买siRNA时均免费附赠。完整序列信息可用于实验结果分析和抑制验证。如有需要，siRNA序列信息可用于研究报告中。 修饰选择FlexiTube siRNA的20 nmol规格可提供标记，包括Alexa Fluor、荧光素、罗丹明、Cy3和Cy5染料，或氨基酸接头、硫代接头和磷酸盐修饰等修饰选择。 Procedure 对于低通量和高通量siRNA转染，分别推荐使用HiPerFect Transfection Reagent和HiPerFect HTS Reagent。 Applications FlexiTube siRNA和FlexiTube GeneSolution是分析少量靶基因的理想产品，适用于功能基因组学和通路分析。 |
| 供应商 | Qiagen |